Diferencia entre RNASE A y RNASE H

Diferencia clave - RNASE A vs RNASE H
 

Las ribonucleasas son nucleasas que degradan específicamente el ARN en unidades más pequeñas. Se pueden dividir en dos categorías; endorribonucleasas y exoribonucleasas. La endoribonucleasa es una endonucleasa que puede degradar el ARN monocatenario o bicatenario. Se escinde los enlaces fosfodiéster dentro de una cadena de polinucleótido de ARN. Los ejemplos son RNasa A, RNase III, RNase T1, RNase P y RNase H. La exoribonucleasa es una exonucleasa que degrada el ARN mediante la eliminación de nucleótidos terminales del extremo 5 'o del extremo 3' de la molécula de ARN. Los ejemplos son RNase R, RNase II, RNase D y RNase PH. los diferencia clave entre RNASE A y RNASE H es que la La RNasa A es una ribonucleasa pancreática que degrada específicamente el ARN monocatenario en componentes más pequeños, mientras que la RNasa H es una enzima no específica que escinde el ARN en el híbrido ARN-ADN en unidades más pequeñas a través del mecanismo hidrolítico.

CONTENIDO

1. Resumen y diferencia clave
2. ¿Qué es RNASE A?
3. ¿Qué es RNASE H?
4. Similitudes entre RNASE A y RNASE H
5. Comparación lado a lado - RNASE A vs RNASE H en forma tabular
6. Resumen

¿Qué es RNASE A??

La RNasa A es una ribonucleasa pancreática que escinde específicamente los residuos de citosina y uracilo no pareados en el extremo 3 'del ARN monocatenario. La RNasa H funciona a una concentración de sal más alta (0.3M o una concentración de NaCl más alta). La reacción hidrolítica es de dos pasos. Forma un producto fosforilado en 3 'a través de un intermedio de monofosfato cíclico en 2' y 3 '. Aunque es específico para el ARN monocatenario a una mayor concentración de sal, también puede degradar el ARN bicatenario y el ARN en el híbrido ARN-ADN a una menor concentración de NaCl (inferior a 0.3 M de NaCl).

Bruce Merrifield sintetizó por primera vez esta enzima. RNase A es una enzima muy popular en la investigación molecular. La RNasa A pancreática bovina es un ejemplo de RNasa A. Y es una de las enzimas más resistentes que se utilizan en el laboratorio. Esta enzima no necesita un cofactor para su actividad. Es una enzima altamente termoestable. RNasa A es la primera enzima y la tercera proteína a la que se detectó una secuencia correcta de aminoácidos. Esta enzima es muy pequeña con 124 aminoácidos y una masa molecular de 12600da. Y tiene cuatro residuos de histidina (His 12 y His 119 que participan en la reacción catalítica).

Figura 01: La RNasa A

La ARNasa A se puede aislar hirviendo una muestra cruda. Cuando hierve, todas las demás enzimas degradan la RNasa A restante. La RNase A es una enzima increíblemente estable. Esta enzima inhibe con la proteína inhibidora de la ribonucleasa, los complejos de metales pesados ​​y el vanadato de uridina..

Que es RNase H?

La RNasa H es una enzima ribonucleasa no específica que puede degradar el ARN en el híbrido ARN-ADN mediante una reacción hidrolítica. La RNasa H escinde el enlace 3 '- O-P del ARN en un híbrido ARN-ADN. En última instancia, produce 3'OH y 5 'terminados en fosfato. En la replicación del ADN, desempeña un papel fundamental al eliminar el cebador de ARN luego de que se forman nuevas cadenas de ADN. En condiciones de laboratorio, degrada específicamente el ARN en el híbrido ARN-ADN pero no el ADN y el ARN no hibridado. Y esta enzima se usa generalmente para destruir la plantilla de ARN después de que se forme la primera cadena de ADN complementaria durante la síntesis de ADNc.

Figura 02: RNase H

RNasa H también se utiliza en ensayos de protección de nucleasas. También se puede incorporar a la eliminación de la cola de poli A del ARNm. La ARNasa H tiene la capacidad de destruir el ARN no codificante dentro y fuera de la célula. Los iones metálicos son necesarios como cofactores para esta actividad de la proteína. Se puede usar un quelante (EDTA) para inhibir la enzima RNasa H.

¿Cuáles son las similitudes entre RNASE A y RNASE H??

  • Ambos son proteínas en la naturaleza..
  • Ambas son endoribonucleasas
  • Ambos pueden degradar el ARN.
  • Ambos realizan reacciones hidrolíticas..
  • Los laboratorios moleculares utilizan estos dos.

¿Cuál es la diferencia entre RNASE A y RNASE H??

RNASE A vs RNASE H

RNasa A es una ribonucleasa pancreática que corta específicamente el extremo 3 'de los residuos de citosina y uracilo no pareados del ARN monocatenario a una mayor concentración de sal.. La ARNasa H es una enzima ribonucleasa no específica que puede degradar el ARN en el híbrido ARN-ADN mediante una reacción hidrolítica.
 Naturaleza de la hebra de ARN
La RNasa A corta específicamente el ARN monocatenario a una mayor concentración de sal. La ARNasa H escinde el ARN en el híbrido ARN-ADN..
Necesidad de co-factores para la actividad
RNase A no necesita cofactores para su actividad.. La RNasa H necesita iones metálicos como cofactores para su actividad..
 Inhibidores de la actividad de la proteína
La proteína inhibidora de la ribonucleasa, los complejos de vanadato de metal pesado y uridina inhiben la actividad de la ARNasa A. Un quelante (EDTA) inhibe la actividad de la ARNasa H.
Eliminación de cebadores de ARN en la replicación de ADN
RNasa A no se utiliza para la eliminación de cebadores de ARN en la replicación de ADN. RNasa H se utiliza para la eliminación de cebadores de ARN en la replicación de ADN
Eliminación de la plantilla de ADN en la síntesis de ADN complementario (ADN-C)
La RNasa A no se utiliza para la eliminación de la plantilla de ARN durante la síntesis complementaria de ADN (C-ADN). La ARNasa H se usa para la eliminación de la plantilla de ARN durante la síntesis de ADN complementario (ADN-C).
Eliminación de Poly-A-Tail en mRNA hibridado a Oligo (dt)
RNasa A no se usa para eliminar la "cola poli-A" en ARNm hibridado a oligo (dt). RNase H se usa para eliminar la "cola poli-A" en ARNm hibridado a oligo (dt)

Resumen - RNASE A vs RNASE H

Las ribonucleasas son enzimas nucleasas que tienen la capacidad de dividir el ARN en unidades más pequeñas. Son dos tipos; endorribonucleasas y exoribonucleasas. La endoribonucleasa es una endonucleasa que tiene la capacidad de degradar el ARN monocatenario o bicatenario. Y rompe el enlace fosfodiéster dentro de una cadena de polinucleótido de ARN. RNase A y RNase H son dos endorribonucleasas. La RNasa A es una ribonucleasa pancreática que escinde específicamente los residuos de citosina y uracilo no emparejados en el extremo 3 'del ARN monocatenario a una mayor concentración de sal. La ARNasa H es una enzima ribonucleasa no específica que puede degradar el ARN en el híbrido ARN-ADN mediante una reacción hidrolítica. Esta es la diferencia entre RNase A y RNase H.

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Referencia:

1.Karuturi, Autor Amrutha. “17 necesito saber información sobre RNase A.” AG Blog, 22 de febrero de 2017. Disponible aquí
2. “Ribonucleasa”. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 5 de enero de 2018. Disponible aquí  

Imagen de cortesía:

1.'RNase A'By No se proporciona un autor legible por máquina. Vossman asumió (basado en reclamaciones de derechos de autor)., (CC BY-SA 2.5) vía Commons Wikimedia
2.'RNase H fix'By No se proporciona un autor legible por máquina. Vossman asumió (basado en reclamaciones de derechos de autor)., (CC BY-SA 2.5) vía Commons Wikimedia