los diferencia principal entre la nitrocelulosa y la membrana de nylon es que la La membrana de nitrocelulosa tiene una alta afinidad por la unión a proteínas, mientras que la membrana de nylon tiene una alta afinidad por la unión a ácidos nucleicos.. Además, las interacciones hidrófobas y electrostáticas se unen a las macromoléculas con las membranas de nitrocelulosa, mientras que las interacciones iónicas, hidrófobas y electrostáticas se unen a las macromoléculas con las membranas de nylon.
La nitrocelulosa y la membrana de nylon son dos tipos de membranas a las que las macromoléculas se transfieren desde el gel. Sin embargo, las membranas de nitrocelulosa se pueden usar para unir el ADN y el ARN también..
1. ¿Qué es una membrana de nitrocelulosa?
- Definición, Estructura, Mecanismo de Encuadernación, Ventajas.
2. ¿Qué es una membrana de nylon?
- Definición, Estructura, Mecanismo de Encuadernación, Ventajas.
3. ¿Cuáles son las similitudes entre la nitrocelulosa y la membrana de nylon?
- Esquema de características comunes
4. ¿Cuál es la diferencia entre la nitrocelulosa y la membrana de nylon?
- Comparación de diferencias clave
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La membrana de nitrocelulosa es una matriz común utilizada en la transferencia de Western debido a la alta afinidad de unión a proteínas. Sin embargo, se puede usar para detectar ácidos nucleicos aparte de proteínas inmovilizadas y glicoproteínas. La inmovilización de las macromoléculas se produce principalmente a través de interacciones hidrófobas. Los enlaces de hidrógeno también se forman entre los grupos nitro de la membrana y las cadenas laterales de aminoácidos de las proteínas. La inmovilización de proteínas será alta en concentraciones altas de sal y de metanol.
Figura 1: Principio de Blot
Las membranas de nitrocelulosa están disponibles en formas 100% puras de nitrocelulosa con un área de superficie alta, que es uniforme. Los pre-tamaños disponibles son 0.2 μm y 0.45 μm. El tamaño de poro pequeño es mejor para la unión con proteínas pequeñas (<14 kDa). The binding and retaining capacity of proteins is 80-250 μg/cm2. Las membranas premontadas están listas para usar. Una de las principales ventajas de las membranas de nitrocelulosa es su fondo muy bajo, ya que se puede bloquear fácilmente. Las membranas de nitrocelulosa soportadas pueden ser peladas y reprobadas..
La membrana de nylon es una matriz ampliamente utilizada para la unión de ácidos nucleicos. Las membranas de nylon son mecánicamente fuertes que las membranas de nitrocelulosa. Los dos tipos principales de membranas de nailon que se utilizan en la transferencia son Biodyne A y Biodyne B. El tamaño de los poros de ambos tipos es de 0,45 μm. Son resistentes al calor y disolventes. Además, no se encogerán, agrietarán ni rasgarán. Ambos dan un fondo bajo que las membranas de nitrocelulosa..
Figura 2: Membrana Southern Blot
La membrana de nitrocelulosa se refiere a una membrana pegajosa utilizada para inmovilizar ácidos nucleicos y proteínas en la transferencia, mientras que la membrana de nailon se refiere a un tipo de membrana con alta resistencia y resistencia al calor utilizada para inmovilizar macromoléculas.
Las membranas de nitrocelulosa están compuestas de celulosa nitrada, mientras que las membranas de nailon están compuestas por Bodyne A y Biodyne B de nylon sin modificar o con carga positiva..
El tamaño de los poros de las membranas de nitrocelulosa es de 0.2 μm y 0.45 μm, mientras que el tamaño de los poros de las membranas de nylon es de 0.45 μm..
Las membranas de nitrocelulosa son quebradizas y, por lo tanto, no son reutilizables, mientras que las membranas de nailon son mecánicamente fuertes..
La transferencia electroforética se utiliza principalmente en la transferencia de proteínas a las membranas de nitrocelulosa, mientras que la transferencia capilar es la práctica común con las membranas de nailon..
Las membranas de nitrocelulosa tienen una alta afinidad por las proteínas, mientras que las membranas de nailon tienen una alta afinidad por los ácidos nucleicos. Las membranas de nitrocelulosa también pueden usarse para ácidos nucleicos..
Las membranas de nitrocelulosa son mejores para la transferencia Western, mientras que las membranas de nylon son mejores para la transferencia Southern y Northern.
Las interacciones hidrofóbicas y electrostáticas unen macromoléculas a las membranas de nitrocelulosa, mientras que las interacciones iónicas, hidrofóbicas y electrostáticas unen macromoléculas a las membranas de nylon..
La capacidad de unión a proteínas de la membrana de nitrocelulosa es de 80-250 μg / cm.2 mientras que la capacidad de unión a proteínas de la membrana de nylon es de 150-200 μg / cm2.
La membrana de nitrocelulosa es una membrana frágil que se usa principalmente para inmovilizar proteínas en Western blot, mientras que la membrana de nylon es una membrana fuerte que se usa principalmente para inmovilizar ácidos nucleicos. Las membranas de nitrocelulosa se unen a las moléculas a través de interacciones hidrófobas, mientras que las membranas de nailon se unen a las moléculas a través de interacciones electrostáticas. Por lo tanto, la principal diferencia entre la membrana de nitrocelulosa y nylon es la afinidad..
1. "Membranas de nitrocelulosa para Western Blotting | Thermo Fisher Scientific - LK ". Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, disponible aquí
2. "Membrana de nylon Biodyne A, 0,45 m, 8 cm x 12 cm". Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, disponible aquí
3. "Membrana de nylon Biodyne B, 0,45 m, 8 cm x 12 cm". Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, disponible aquí
1. "Blot biology" Por Gbdivers - Trabajo propio (CC BY-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia
2. “Membrana de transferencia Southern” Por Bojan Žunar - Trabajo propio (CC BY-SA 4.0) a través de Commons Wikimedia