Diferencia entre el vector de clonación y el vector de expresión
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Diferencia principal - Vector de clonación vs Vector de expresión
Vector de clonación y vector de expresión son dos tipos de vectores, utilizados en tecnología de ADN recombinante para transportar segmentos de ADN extraños a una célula diana. Tanto los vectores de clonación como los de expresión comprenden el origen de la replicación, los sitios de restricción únicos y el gen marcador seleccionable en sus secuencias de vectores. Tanto los vectores de clonación como los de expresión son auto-replicativos debido a la presencia de un origen de replicación. Los vectores de clonación pueden ser plásmidos, cósmidos o bacteriófagos. los diferencia principal entre el vector de clonación y el vector de expresión es que el vector de clonación se usa para transportar segmentos de ADN extraños a una célula huésped, mientras que el vector de expresión es un tipo de vector de clonación, que contiene señales de expresión adecuadas con la máxima expresión génica.
Áreas clave cubiertas
1. ¿Qué es un vector de clonación?
- Definición, Tipos, Usos
2. ¿Qué es un vector de expresión?
- Definición, Tipos, Usos
3. ¿Cuáles son las similitudes entre el vector de clonación y el vector de expresión?
- Esquema de características comunes
4. ¿Cuáles son las diferencias entre el vector de clonación y el vector de expresión?
- Comparación de diferencias clave
Términos clave: Bacteriófagos, vector de clonación, cósmidos, ADN, tecnología de ADN, expresión de expresión, vector de expresión, origen de la replicación, región promotora, ARN recombinante, plásmidos, sitios de restricción, marcador seleccionable
¿Qué es un vector de clonación?
Los vectores de clonación sirven como moléculas portadoras de ADN. Todos los vectores de clonación tienen cuatro características especiales:
- Son auto-replicativos junto con el segmento de ADN extraño que llevan
- Contienen varios sitios de restricción, que están presentes solo una vez en el vector.
- Llevan un marcador seleccionable, típicamente en forma de genes de resistencia a antibióticos, que están ausentes en el genoma del huésped.
- Son relativamente fáciles de recuperar de la célula huésped..
Hay muchas opciones de vectores de clonación clásicos, como plásmidos, fagos y cósmidos, según el propósito. La elección de un vector de clonación depende del tamaño del inserto y la aplicación.
Plásmidos
Los plásmidos son moléculas de ADN bicatenarias, extracromosómicas y de origen natural, que son capaces de replicarse de manera autónoma dentro de las células bacterianas. El límite de tamaño del inserto en plásmidos es de 10 kb. Los plásmidos se utilizan como vectores de clonación en la subclonación y la manipulación posterior, la clonación de ADNc y los ensayos de expresión. El pBR322 es uno de los primeros plásmidos genéticamente diseñados para ser utilizados en tecnologías de ADN recombinante. El plásmido pBR322 se muestra en Figura 1.
Figura 1: pBR322
Fagos
Los fagos se derivan del bacteriófago lambda en el que el cos El sitio del bacteriófago lambda permite empaquetarlo en una cabeza de fago. La replicación del ADN del vector dentro de la célula huésped finalmente causará la lisis celular. El tamaño del inserto que se puede insertar en un vector de fago es de 5-12 kb. Los vectores fágicos se utilizan en la clonación de ADN genómico, la clonación de ADNc y las bibliotecas de expresión.
Cósmidos
Los cósmidos son un tipo de plásmidos que contienen cos Sitio del bacteriófago lambda. los cos El sitio del bacteriófago lambda permite empaquetarlo en una cabeza de fago. Aunque es un plásmido, la replicación de los cósmidos dentro de la célula huésped puede no lisar la célula como en los vectores fágicos. El tamaño del inserto que se puede clonar en un vector cósmido es de 35-45 kb. Los vectores cósmidos se utilizan en construcciones de bibliotecas genómicas..
Dado que los genes de los mamíferos a menudo tienen un tamaño superior a 100 kb, la secuencia génica completa no puede clonarse con los vectores de clonación clásicos. Este problema se evita mediante la imitación de las propiedades de los cromosomas de la célula huésped en vectores. Este tipo de vectores se denominan vectores cromosómicos artificiales. BACs (vectores de cromosomas artificiales bacterianos), YACs (vectores de cromosomas artificiales de levadura) y MAC (vectores de cromosomas artificiales de mamíferos) son tipos de vectores de cromosomas artificiales.
BACs
Los vectores de cromosomas artificiales bacterianos se basan en Escherichia coli Factor plásmido factor. El tamaño del inserto que se puede clonar en un vector BAC es de 75-300 kb. Los vectores BAC se utilizan en el análisis de genomas grandes..
YACs
Los vectores de cromosomas artificiales de levadura se basan en Saccharomyces cerevisiae Centromere, telomere, y otras secuencias de replicación autónoma. El tamaño del inserto que se puede clonar en un vector YAC es de 100-1 Mb. Los vectores YAC se utilizan en el análisis de genomas grandes..
MACs
Los vectores de cromosomas artificiales de mamíferos se basan en el centrómero de los mamíferos, el telómero y el origen de la replicación. El tamaño de inserción en los MAC es de 100 kb a 1 Mb. Los MAC se utilizan en biotecnología animal y terapia génica humana..
¿Qué es un vector de expresión?
Vectores de expresión, también conocidos como expresión de construcción, Son un tipo de plásmidos. Se introduce un gen especial en una célula huésped mediante vectores de expresión donde la expresión del gen transformado es facilitada por el vector de expresión con el uso de maquinaria de transcripción y traducción celular. Un vector de expresión comprende secuencias reguladoras como potenciadores y regiones promotoras, que conducen a una expresión génica eficiente. Después de la expresión de una proteína particular como la insulina dentro de una célula huésped, el producto debe ser purificado de las proteínas de la célula huésped. En ese sentido, la proteína introducida está marcada con histidina (etiqueta His) o cualquier otra proteína. Con el fin de obtener una expresión eficiente del gen introducido dentro de una célula huésped, las siguientes señales de expresión deben introducirse en un vector de expresión.
- Inserción de un promotor fuerte..
- Inserción de un codón de terminación fuerte.
- Distancia considerable entre la región promotora y el gen clonado.
- Inserción de una secuencia de iniciación de la transcripción..
- Inserción de una secuencia de iniciación de la traducción..
Figura 2: pGEX-3X
Similitudes entre el vector de clonación y el vector de expresión
- Tanto los vectores de clonación como los de expresión se usan para introducir segmentos de ADN extraño en una célula objetivo conocida como la célula huésped..
- Tanto los vectores de clonación como los vectores de expresión comparten características comunes como el origen de la replicación, los sitios de restricción únicos y el gen marcador seleccionable en su secuencia de vectores..
- Tanto los vectores de clonación como los vectores de expresión son capaces de replicarse independientemente dentro de la célula huésped.
Diferencia entre el vector de clonación y el vector de expresión
Definición
Vector de clonación: El vector de clonación es una pequeña porción de ADN que se puede mantener de manera estable dentro de una célula huésped. Se utiliza para introducir genes en las células y obtener numerosas copias del inserto..
Vector de expresión: El vector de expresión es un plásmido que se utiliza para introducir un gen específico en una célula diana y los mecanismos de las células de control para producir el producto génico relevante..
Papel
Vector de clonación: Los vectores de clonación se utilizan para obtener numerosas copias del segmento de ADN insertado..
Vector de expresión: Los vectores de expresión se utilizan para obtener el producto génico del segmento de ADN insertado, ya sea una proteína o un ARN..
Los tipos
Vector de clonación: Los vectores de clonación pueden ser plásmidos, cósmidos, fagos, BAC, YAC o MAC..
Vector de expresión: Vector de expresión es un vector plasmídico..
Características del vector
Vector de clonacion: Los vectores de clonación comprenden un origen de replicación, sitios de restricción únicos y un marcador seleccionable.
Vector de expresión: El vector de expresión comprende potenciadores, región promotora, codón de terminación, secuencia de iniciación de la transcripción y secuencia de iniciación de la traducción en el vector, además de las características típicas de un vector de clonación..
Conclusión
Los vectores de clonación y los vectores de expresión se usan fácilmente en tecnología de ADN recombinante para introducir segmentos de ADN extraños en las células diana. Tanto los vectores de clonación como los vectores de expresión son capaces de replicarse por sí mismos dentro de la célula huésped. Los vectores de clonación se usan típicamente para introducir genes extraños en las células diana y al mismo tiempo lograr numerosas copias del gen introducido. Los vectores de expresión se utilizan para obtener el producto génico, ya sea una proteína o un ARN del gen introducido dentro de la célula huésped. La mayoría de las proteínas recombinantes como la insulina se producen mediante el uso de vectores de expresión. La principal diferencia entre el vector de clonación y el vector de expresión es la aplicación de cada vector en tecnología de ADN recombinante..
Referencia:
1. “Clonación de vectores”. Clonación y análisis molecular de genes. N.p., n.d. Web. Disponible aquí. 18 de junio de 2017.
2. "Vectores lanzadera y vectores de expresión". Sin límites. Sin límites, 26 de mayo de 2016. Web. Disponible aquí. 18 de junio de 2017.
Imagen de cortesía:
1. “PBR322" Por Ayacop (+ Yikrazuul) - Trabajo propio (Dominio público) a través de Commons Wikimedia
2. “Vector de clonación PGEX-3X” Por Magnus Manske - Creado por Magnus Manske (CC BY-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia
