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Diferencia entre la tinción de Gram y el ácido rápido

Microbiología
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Diferencia Clave - Tinción de Gram vs Ácido Rápido
  

Las bacterias son microorganismos muy pequeños. Son transparentes y su detección es difícil en condiciones de vida y no teñidas. Por lo tanto, se desarrollan varios métodos de tinción para facilitar la detección bacteriana. Hay tres tipos principales de técnicas de tinción: tinción simple, tinción diferencial y tinción estructural. La tinción diferencial es una técnica que utiliza más de una mancha para diferenciar las bacterias. La tinción de Gram y la tinción ácida se conocen más popularmente como tinciones diferenciales. La tinción de Gram es una técnica de tinción diferencial, que separa las bacterias en dos grupos conocidos como bacterias Gram-positivas y bacterias Gram-negativas. La tinción ácida es una tinción diferencial que se usa para identificar organismos ácido-rápidos como Mycobacterium de organismos no ácidos rápidos. Esta es la diferencia clave entre la tinción de Gram y la tinción de Acid Fast..

CONTENIDO

1. Resumen y diferencia clave
2. ¿Qué es la tinción de Gram? 
3. Que es Acid Fast
4. Similitudes entre Gram Stain y Acid Fast
5. Comparación lado a lado - Tinción de Gram versus ayuno de ácido en forma tabular
6. Resumen

¿Qué es la tinción de Gram??

La tinción de Gram es una importante técnica de tinción diferencial utilizada para la identificación bacteriana en microbiología. Esta técnica fue introducida por el bacteriano biólogo danés Hans Christian Gram en 1884. La tinción de Gram clasifica las bacterias en dos grupos principales denominados Gram positivos y Gram negativos, que son muy importantes en la clasificación e identificación de bacterias. Los microbiólogos realizan la tinción de Gram como un paso inicial en la caracterización bacteriana durante sus estudios..

Las bacterias se agrupan en función de las diferencias en su pared celular. Las bacterias grampositivas se componen de una capa gruesa de peptidoglicano en su pared celular, mientras que las bacterias gramnegativas se componen de una capa delgada de peptidoglicano en su pared celular. El resultado de la tinción de Gram se basará en la diferencia en el grosor de la capa de peptidoglicano de la pared celular.

La tinción de Grams se realiza utilizando cuatro reactivos diferentes a saber; Tinción primaria, mordiente, agente decolorante y tinción contraria. El cristal violeta y la safranina se utilizan como tinciones primarias y de mostrador, mientras que los gramos de yodo y el 95% de alcohol se utilizan como mordiente y decolorante, respectivamente. Los pasos básicos de la mancha de gramos son los siguientes;

  1. Se prepara un frotis bacteriano en un portaobjetos de vidrio limpio, se fija por calor y se enfría.
  2. El frotis se inunda con cristal violeta durante 1 a 2 minutos.
  3. El enjuague se enjuaga con agua corriente lenta para eliminar el exceso de manchas.
  4. Grams yodo se aplica a la prueba de frotis durante 1 minuto.
  5. El enjuague se enjuaga con agua corriente lenta
  6. El frotis se lava con alcohol al 95% durante 2 a 5 segundos y se enjuaga con agua corriente del grifo..
  7. El frotis se tiñe a la inversa con safranina durante 1 minuto
  8. El frotis se enjuaga con agua corriente lenta, se seca y se observa bajo el microscopio.

Al final de la tinción de Gram, las bacterias gram negativas se observarán en color rosa, mientras que las bacterias grampositivas se observarán en color púrpura.

Figura 01: bacterias Gram negativas y Gram positivas.

El resultado de la tinción de gramos se decide por el grosor de la capa de peptidoglicano en su pared celular. Durante la etapa de decoloración, la tinción primaria y el mordiente se eliminan fácilmente de las bacterias gramnegativas y se vuelven incoloros ya que tienen una capa delgada de peptidoglicano. La tinción primaria se conserva en las bacterias gram positivas ya que tienen una capa gruesa de peptidoglicano. La tinción contraria no será efectiva para las bacterias gram positivas debido a la retención de la tinción primaria. Por lo tanto, los gramos de bacterias positivas serán visibles en el color de la mancha primaria, es decir, el color púrpura. La tinción contraria manchará las bacterias gramnegativas y serán visibles en el color de selección, que es el color safranin. Por lo tanto, es fácil clasificar las bacterias en dos grupos por tinción de gramo y es valioso en la diferenciación e identificación bacteriana.

Que es Acid Fast?

La resistencia a los ácidos es una propiedad física de ciertas bacterias, específicamente su resistencia a la decoloración por los ácidos durante los procedimientos de tinción. Una vez teñidos, estos organismos resisten el ácido diluido y los procedimientos de decoloración basados ​​en etanol comunes en muchos protocolos de tinción. Por lo tanto, el nombre 'ácido rápido' se da a esos organismos. Esta propiedad se muestra debido a que tiene un alto nivel de material ceroso (ácidos micólicos) en sus paredes celulares. Esta prueba es crítica para la identificación de Tuberculosis micobacteriana.

Figura 2: Micobacterias ácidas rápidas

Esta tinción ácida rápida fue desarrollada por Paul Ehrlich en 1882. La técnica rápida ácida de Ehrlich fue modificada por Ziehl-Neelsen y ahora se usa más frecuentemente. El procedimiento de tinción ácida rápida involucra tres reactivos diferentes. Carbol fuschin se utiliza como la mancha primaria. El alcohol ácido se utiliza como agente decolorante. El azul de metileno se utiliza como tinción contraria. El procedimiento de tinción se realiza de la siguiente manera.

  1. La tinción primaria (carbol fuchsin) se aplica a la muestra fija en el portaobjetos (todas las células se teñirán de color rojo).
  2. La diapositiva se calienta al vapor durante 5 minutos, lo que lleva las manchas a las celdas correctamente.
  3. Luego se agrega la solución decolorante (esto elimina el tinte rojo de todas las células excepto las bacterias ácidas rápidas).
  4. Se agrega azul de metileno como tinción contraria (colorea todas las células bacterianas decoloradas).
  5. Las bacterias ácidas rápidas permanecen rojas mientras que las bacterias rápidas no ácidas se tiñen de azul.

¿Cuáles son las similitudes entre Gram Stain y Acid Fast??

  • La tinción de Gram y el Acido rápido son dos técnicas de tinción diferencial.
  • Ambas técnicas categorizan las bacterias en dos grupos..
  • Ambas técnicas utilizan dos manchas y una decolorante..

¿Cuál es la diferencia entre Gram Stain y Acid Fast??

Gram Stain vs Acid Fast
La tinción de Gram es una técnica de tinción diferencial que separa las bacterias en dos grupos: bacterias grampositivas y bacterias gramnegativas. La tinción rápida ácida es una tinción diferencial que se usa para identificar organismos ácidos rápidos de organismos no ácidos rápidos.
Mancha primaria
El cristal violeta es la tinción primaria más utilizada en la tinción de gram. Carbol fuchsin es la mancha primaria utilizada en ácido rápido.
Agente decolorante
El 95% de alcohol se usa como agente decolorante en la tinción de gram. El alcohol ácido se usa como agente decolorante en el ácido rápido..
Mancha de mostrador
La tinción de Gram usa safranina como la tinción contraria. La tinción ácida rápida utiliza azul de metileno como tinción contraria.
Observación
Las bacterias gram negativas se observan en el color de selección y los gramos de bacterias positivas se observan en color púrpura. Las bacterias ácidas rápidas se observan en color rojo y las bacterias no ácidas rápidas se observan en color azul.

Resumen - Gram Stain vs Acid Fast

La visualización de microorganismos en estado vivo es difícil. Por lo tanto, las tinciones biológicas y los procedimientos de tinción se utilizan ampliamente para estudiar sus propiedades. La tinción diferencial es un tipo de técnica de tinción utilizada para diferenciar las bacterias. La tinción de Gram y la tinción ácida rápida son dos técnicas de tinción diferencial. La tinción de Gram diferencia bacterias gram negativas y bacterias gram positivas en función del grosor de sus paredes celulares. La tinción ácida rápida diferencia las bacterias ácidas rápidas de las bacterias no ácidas rápidas en función del contenido de ácido micólico en la pared celular. Esta es la diferencia entre el ácido rápido y la tinción de gramo..

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Referencias:

1. Aryal, Sagar. "Principio, procedimiento, interpretación y ejemplos de tinción ácido-rápido". Notas de microbiología en línea. N.p., 08 de mayo de 2017. Web. Disponible aquí. 20 de julio de 2017.
2. Tinciones diferenciales para la identificación de bacterias: Gram, Ácido-rápido y Endospora. N.p., n.d. Web. Disponible aquí. 20 de julio de 2017.

Imagen de cortesía:

1. "Nódulo linfático - Infección por micobacterias atípicas (AMI) - Tinción de AFB" por Yala Rosen (CC BY-SA 2.0) vía Flickr
2. "Gram stain 01" Por Y tambe - Archivo de Y tambe (CC BY-SA 3.0) vía Commons Wikimedia

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