Diferencia entre electroforesis en gel y SDS PAGE
Share
los diferencia principal Entre electroforesis en gel y SDS PAGE es que La electroforesis en gel es una técnica utilizada para separar el ADN, el ARN y las proteínas, mientras que la SDS PAGE es un tipo de electroforesis en gel que se utiliza principalmente para separar las proteínas.. En general, SDS PAGE proporciona una mejor resolución que la electroforesis en gel regular..
La electroforesis en gel y SDS PAGE son técnicas en biotecnología que ayudan en la separación de macromoléculas según la carga y el tamaño. Por lo general, la electroforesis en gel usa piquetas de gel de agarosa para la separación, mientras que SDS PAGE usa piquetas de gel de poliacrilamida.
Áreas clave cubiertas
1. ¿Qué es la electroforesis en gel?
- Definición, Procedimiento, Importancia
2. ¿Qué es SDS PAGE?
- Definición, Procedimiento, Importancia
3. ¿Cuáles son las similitudes entre la electroforesis en gel y la SDS PAGE?
- Esquema de características comunes
4. ¿Cuál es la diferencia entre electroforesis en gel y SDS PAGE?
- Comparación de diferencias clave
Términos clave: Agarosa, ADN, electroforesis en gel, poliacrilamida, proteínas, SDS PAGE
¿Qué es la electroforesis en gel?
La electroforesis en gel es una técnica que separa fragmentos de macromoléculas como el ADN, el ARN y las proteínas en función de su tamaño y carga. Durante la electroforesis en gel, las macromoléculas se mueven bajo la influencia de un campo eléctrico en una matriz de gel, que contiene poros a través de los cuales se mueven las macromoléculas. La electroforesis en gel es la técnica general que analiza el ADN de PCR, RFLP, clonación, secuenciación de ADN o técnicas de transferencia. Las nanopartículas también se pueden separar por electroforesis en gel. La barra de gel se prepara a partir de un polisacárido llamado agarosa derivado de algas marinas. Los geles de agarosa consisten en moléculas de agarosa de cadena larga interconectadas como una tela de araña. los video 1 Describe la preparación de un gel de agarosa..
Tanto el ADN como el ARN contienen grupos fosfato en cada uno de sus nucleótidos monómeros. Por lo tanto, poseen igual carga negativa en toda la molécula. Además, migran hacia el electrodo positivo debajo del campo eléctrico. La velocidad de migración depende del tamaño del ácido nucleico. Las moléculas más cortas migran más rápido a través de los poros, mientras que las más grandes toman algún tiempo..
Figura 1: Bandas de ADN en un gel de agarosa
¿Qué es SDS PAGE?
SDS PAGE (electroforesis en gel de dodecil sulfato de sodio y poliacrilamida) es una técnica analítica utilizada para separar las moléculas cargadas según el tamaño. En este proceso, SDS se utiliza para aislar proteínas desnaturalizándolas. Como SDS es un detergente; la estructura terciaria de las proteínas se rompe, lo que hace que la proteína plegada se convierta en una molécula lineal. Además, recubre esa molécula de proteína lineal con una carga negativa uniforme. SDS PAGE consiste en dos geles con diferentes concentraciones. La capa superior se llama el gel de apilamiento en el que se cargan las muestras, mientras que la capa inferior se llama el gel de resolución. La concentración de poliacrilamida en el gel de apilamiento es de 3.5-4% (tamaño de poro grande) y concentra las proteínas en una banda. La concentración de poliacrilamida en el gel de resolución es del 4-20% (tamaño de poro pequeño) y separa las proteínas según su tamaño. los video 2 Muestra la preparación de una SDS PAGE..
SDS PAGE proporciona una rápida separación de proteínas, lo que facilita el análisis posterior, como el Western Blot.
Figura 2: Bandas de proteínas en SDS PAGE
Dado que el poder de resolución de SDS PAGE es superior al de un gel de agarosa normal, SDS PAGE ayuda a separar pequeños fragmentos de ADN con un tamaño de 5-500 pb.
Similitudes entre la electroforesis en gel y la SDS PAGE
- La electroforesis en gel y SDS PAGE son técnicas que separan las macromoléculas según su carga y tamaño..
- Ambas técnicas utilizan una punción de gel con poros pequeños a través de los cuales se mueven las macromoléculas..
- La fuerza motriz es la diferencia de potencial entre los dos electrodos..
Diferencia entre electroforesis en gel y SDS PAGE
Definición
Electroforesis en gel: Técnica utilizada para separar fragmentos de macromoléculas como el ADN, el ARN y las proteínas según su tamaño y carga.
PAGINA DE SDS: Una técnica analítica utilizada para separar moléculas cargadas en función del tamaño.
Composición
Electroforesis en gel: Igual en todo el gel; compuesto de agarosa
PAGINA DE SDS: Dos geles con diferentes concentraciones; compuesto de poliacrilamida
Ejecutar configuración
Electroforesis en gel: Carrera horizontal
PAGINA DE SDS: Carrera vertical
Metodología de Casting
Electroforesis en gel: Establece a medida que se enfría
PAGINA DE SDS: Conjuntos por una reacción química.
Tamaño de poro
Electroforesis en gel: El tamaño del poro no es uniforme; A mayor concentración de agarosa, menor tamaño de poro.
PAGINA DE SDS: El tamaño del poro es uniforme; La proporción de acrilamida a bis-acrilamida determina el tamaño de los poros.
Concentración
Electroforesis en gel: 0.5-2%
PAGINA DE SDS: 6-15%
Separación
Electroforesis en gel: Ácidos nucleicos de 50-20,000 pb.
PAGINA DE SDS: 5-250,000 proteínas Da
Condiciones
Electroforesis en gel: Generalmente se ejecuta bajo condiciones nativas
PAGINA DE SDS: Condiciones de desnaturalizacion
Preparación
Electroforesis en gel: Sencillo
PAGINA DE SDS: Un proceso complejo
Tinción
Electroforesis en gel: Con bromuro de etidio
PAGINA DE SDS: Tinción de coomassie o tinción de plata
Conclusión
La electroforesis en gel es una técnica analítica que separa macromoléculas como el ADN, el ARN y las proteínas según su tamaño. SDS PAGE es un tipo de electroforesis en gel que se utiliza principalmente para separar proteínas en condiciones de desnaturalización. SDS PAGE tiene un mayor poder de resolución en comparación con la electroforesis en gel regular. La principal diferencia entre la electroforesis en gel y la SDS PAGE es el tipo de macromoléculas separadas y su procedimiento..
Referencia:
1. "Electroforesis en gel". Academia Khan, disponible aquí
2. "Electroforesis en gel de poliacrilamida SDS (SDS-PAGE)." Instituto Diamantina, 26 de abril de 2017, disponible aquí
Imagen de cortesía:
1. "Electroforesis en gel 2" de Mnolf - Foto tomada en Innsbruck, Austria (CC BY-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia
2. "Coomassie3" Por Yikrazuul - Trabajo propio (CC BY-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia
