Diferencia entre la hibridación de colonias y placas
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los diferencia principal entre colonia y hibridación de placa es que la la hibridación de colonias es el método utilizado en la selección de colonias bacterianas con los genes deseados, mientras que la hibridación de placas es el método de selección de fagos con genes deseados. Además, la hibridación de colonias se puede usar en la selección de bibliotecas basadas en plásmidos o cósmidos, mientras que la hibridación de placas se puede usar en la selección de bibliotecas de fagos.
La hibridación de colonias y placas son dos técnicas utilizadas en la selección de genotecas genómicas o de ADNc. Ellos tambien son llamados ascensor de colonia y elevación de placa respectivamente.
Áreas clave cubiertas
1. ¿Qué es la hibridación de colonias?
- Definición, tipo de bibliotecas, métodos de selección
2. ¿Qué es la hibridación de placa?
- Definición, tipo de bibliotecas, métodos de selección
3. ¿Cuáles son las similitudes entre la hibridación de colonias y placas?
- Esquema de características comunes
4. ¿Cuál es la diferencia entre la hibridación de colonias y placas?
- Comparación de diferencias clave
Términos clave
Colonia, hibridación de colonias, exploración de bibliotecas, placa, hibridación de placas
¿Qué es la hibridación de colonias?
La hibridación de colonias es un método de selección utilizado en la selección de colonias bacterianas con una secuencia de ADN deseada. También es llamado hibridación de la mancha de colonias, colonización o réplica de placas. Permite el cribado de colonias chapadas con alta densidad. El procedimiento original de hibridación de colonias fue desarrollado por primera vez por Grunstein y Hogness. Primero, las colonias bacterianas pueden transformarse en una membrana y las colonias bacterianas se lisan, exponiendo los ácidos nucleicos. Luego, los ácidos nucleicos expuestos se fijan a la membrana desnaturalizándolos y se hibridan con las sondas radioactivas..
Figura 1: Método de hibridación de colonias
Una colonia es un grupo de bacterias desarrolladas a partir de una sola célula bacteriana a través de la reproducción asexual. Por lo tanto, todas las células bacterianas en una colonia particular poseen la misma composición genética así como el material genético transformado. En general, las bacterias se transforman con la ayuda de plásmidos o vectores cósmidos..
¿Qué es la hibridación de placa?
La hibridación en placa es el método de detección de fagos recombinantes. Es una modificación de la hibridación de colonias por Benton y Devis en 1977. El método también se llama elevación de placa. El procedimiento de hibridación de placa es similar al procedimiento de hibridación de colonias y las placas se levantan poniéndolas en contacto con una membrana de nitrocelulosa. Luego, los ácidos nucleicos se exponen y fijan a la membrana, hibridándose con las sondas deseadas..
Figura 2: Placas en una placa de agar
Una placa es una zona clara en una placa de agar producida por un bacteriófago particular por la lisis de células bacterianas en esa área. Debido a la menor cantidad de ADN transferido a la membrana de nitrocelulosa, la hibridación de la placa produce menos señales de fondo.
Similitudes entre la hibridación de colonias y placas
- La hibridación de colonias y placas son dos técnicas utilizadas en la selección de genotecas o bibliotecas de ADNc.
- El principio fundamental en ambas técnicas es la hibridación de ácidos nucleicos..
- Ambos son métodos de hibridación por filtro, que permiten la selección primaria de bibliotecas mediante la replicación in situ en una membrana de nitrocelulosa.
- Permiten el cribado de alta densidad..
- Se utiliza una molécula de ADN monocatenaria como una sonda, que puede hibridar con su secuencia complementaria para identificar las secuencias específicas..
- Ambas técnicas de hibridación son rápidas y pueden manejar una gran cantidad de clones.
- Se utilizan en la identificación de secuencias de genes incompletas, que no pueden expresarse.
Diferencia entre la hibridación de colonias y placas
Definición
La hibridación de colonias se refiere a un método para seleccionar colonias bacterianas con los genes deseados, mientras que la hibridación de placas se refiere a un método de cribado utilizado en la identificación de fagos recombinantes.
Desarrollado por
La hibridación de la colonia fue desarrollada por primera vez por Grunstein y Hogness, mientras que la hibridación de la placa fue desarrollada por primera vez por Benton y Devis en 1977..
Tipos de bibliotecas
La hibridación de colonias implica la identificación de bibliotecas basadas en plásmidos o cósmidos, mientras que la hibridación de placas implica la identificación de bibliotecas de fagos.
Número de ascensores
Las colonias se pueden levantar por una sola vez, mientras que las placas se pueden levantar varias veces.
Señales de fondo
Se producen más señales de fondo en la hibridación de colonias mientras que las señales de fondo son menos en la hibridación de placas.
Conclusión
La hibridación de colonias es un método de selección de colonias bacterianas en las bibliotecas producidas con plásmidos o vectores cósmidos. Por otro lado, la hibridación de placas es un método de detección de bacteriófagos en las bibliotecas de fagos. La principal diferencia entre la hibridación de colonias y placas es el tipo de bibliotecas seleccionadas en cada método..
Referencia:
1. Kaksonen, Anna. “Enfoques moleculares para el análisis de la comunidad microbiana”. Leaching - BioMineWiki, 20 de abril de 2006, disponible aquí
2. Dale, J W, y P J Greenaway. “Identificación de fagos recombinantes por hibridación de placa”. Métodos en biología molecular (Clifton, N.J.)., Biblioteca Nacional de Medicina de EE. UU., Disponible aquí
Imagen de cortesía:
1. “Blot Hybridization” por Kaksonen - http://wiki.biomine.skelleftea.se/biomine/molecular/index_22.htm (dominio público) a través de Commons Wikimedia
2. “M. smegmatis plaque ”Por Wazzzup7up - Trabajo propio (Dominio público) a través de Commons Wikimedia
