La transfección es un proceso que está involucrado en la transferencia de genes de células eucarióticas utilizando métodos químicos o físicos. La transfección se puede clasificar en dos tipos principales denominados transfección transitoria y transfección estable. Durante la transfección transitoria, el gen de interés no se integra con el genoma del hospedador y se expresa temporalmente dentro del hospedador durante un corto plazo, mientras que, en la transfección estable, el gen de interés se integra con el genoma del hospedador y se mantiene a largo plazo en varias generacioness. Esta es la diferencia clave entre la transfección transitoria y estable. En ambos casos, la transfección es exitosa y los genes se expresan..
CONTENIDO
1. Resumen y diferencia clave
2. ¿Qué es la transfección transitoria?
3. ¿Qué es la transfección estable
4. Comparación lado a lado: transfección transitoria frente a estable
5. Resumen
La transfección es una herramienta importante para insertar genes en células eucariotas. Entre los dos tipos de transfección, la transfección transitoria es una forma común en la transferencia de genes. A través de un vector, los genes extraños se transforman dentro de las células huésped. Una vez que el ADN extraño ingresa a la célula huésped, tiene dos opciones. Puede integrarse con el genoma del host y replicarse, o permanecer dentro sin integrarse en el genoma. La transfección transitoria muestra la expresión temporal de los genes insertados sin integrarse en el genoma del huésped. Los genes expresan y producen la proteína codificada hasta que la célula se divide. Sin embargo, debido a la incapacidad de la integración, no puede replicarse y entrar en las generaciones futuras. Este tipo de transfección es exitoso por un corto período de tiempo. Durante la división celular o debido a algunos otros factores, el ADN extraño se somete a degradación. La transfección transitoria se muestra cuando el ADN extraño está en forma de ADN altamente enrollado..
Figura 01: Transfección Transitoria
La transfección estable muestra una integración exitosa de genes extraños en el genoma del huésped. Una vez que el ADN extraño ingresa dentro de la célula huésped, parte del ADN extraño se integra con el genoma del huésped y se convierte en parte de él. Por lo tanto, el ADN extraño también se replica y pasa a las generaciones futuras cuando el genoma del huésped se replica. Este tipo de transfección es complejo y raro. Sin embargo, debido a la transfección estable en el genoma, este rasgo se mantiene durante un período más largo de varias generaciones.
La transfección estable es un proceso difícil y requiere una entrega efectiva del ADN y la adquisición de células extrañas del ADN en su genoma. Por lo tanto, el ADN lineal favorece la transfección estable que el ADN circular. Sin embargo, la tasa de transfección estable es aproximadamente uno de cada 104 células transformadas. La transfección estable se puede observar mediante la cotransfomación de un marcador seleccionable y realizando la selección artificial en un medio.
Figura 02: Transfección estable
Transfección Transitoria vs Estable | |
El ADN extraño no se integra en un genoma huésped. | El ADN extraño se integra con el genoma del huésped y se convierte en parte de él.. |
Replicación dentro del host | |
Los genes transfectados transitoriamente no se replican dentro del huésped. Por lo tanto, los genes no se pasan a las próximas generaciones.. | Los genes se replican en el host y se transmiten a las generaciones futuras.. |
Duración del tiempo de la expresión génica. | |
Los genes se expresan por un período de tiempo finito y después de eso, se destruyen. | Los genes se convierten en parte del genoma y se expresan dentro de la generación durante un largo período de tiempo.. |
Utilizar | |
Esto es útil para estudiar los efectos de la expresión a corto plazo de genes o productos genéticos.. | Esto es útil para estudiar los efectos de las expresiones genéticas a largo plazo.. |
Detección de la transfección | |
Los genes se expresan y se pueden detectar fácilmente insertando un gen informador. | La transfección estable se puede detectar fácilmente insertando un marcador seleccionable y seleccionando mediante selección artificial en los medios. |
Ocurrencia y proceso | |
La transfección transitoria es común y no es compleja de realizar. | La transfección estable es rara en la ocurrencia y es compleja de realizar. |
Naturaleza del ADN | |
El ADN altamente superenrollado es adecuado para la transfección transitoria. | ADN lineal son adecuados para la transfección estable. |
Aplicaciones | |
Esto se utiliza para estudios de eliminación o silenciamiento de genes con ARN inhibidores, producción de proteínas a pequeña escala. | Esto se utiliza para la producción de proteínas en estudios farmacológicos a largo plazo a gran escala, terapia génica, investigación sobre los mecanismos de regulación genética a largo plazo. |
Las transfecciones transitorias y estables son dos tipos de transfecciones que se muestran durante la transferencia del gen a las células eucariotas mediante sistemas no virales. El ADN extraño transformado no está integrado con el genoma del huésped en la transfección transitoria, mientras que se integra con el genoma del huésped en la transfección estable. El ADN enrollado circular se muestra transfección transitoria, mientras que el ADN lineal prefiere la transfección estable. Esta es la diferencia entre transfección transitoria y estable. Sin embargo, la transfección transitoria es más común y fácil en comparación con la transfección estable. Pero la selección de uno entre dos depende del propósito de la transferencia de genes y la duración del proyecto de investigación..
Referencias:
1. Condreay, J. Patrick, Sam M. Witherspoon, William C. Clay y Thomas A. Kost. “Expresión génica transitoria y estable en células de mamíferos transducidas con un vector de baculovirus recombinante”. Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América. La Academia Nacional de Ciencias, 05 de enero de 1999. Web. 25 de marzo de 2017
2. Kim, Tae Kyung y James H. Eberwine. “La transfección de células de mamíferos: el presente y el futuro”. Química analítica y bioanalítica. Springer-Verlag, agosto de 2010. Web. 25 de marzo de 2017