Diferencia entre Phusion y Taq Polymerase

Diferencia clave - Phusion vs Taq Polimerasa
 

Las ADN polimerasas son enzimas ampliamente utilizadas en las técnicas de biología molecular y también están presentes de forma natural en todos los organismos que experimentan la replicación del ADN. Son las enzimas polimerizantes clave que intervienen durante la replicación. La ADN polimerasa es capaz de agregar nucleótidos al extremo 3 'libre de la cadena de ADN, lo que causa la extensión de una nueva cadena. En la actualidad, debido a los desarrollos de la biología molecular en el diagnóstico de enfermedades y aplicaciones industriales, es importante fabricar polimerasas con varias propiedades beneficiosas. Esto aumenta la precisión del método y lo hace una técnica más rápida. Phusion y Taq polimerasa son dos enzimas polimerasas termoestables producidas comercialmente que se utilizan en aplicaciones moleculares especiales. Phusion es una ADN polimerasa aislada de Pyrococcus furiosus y se utiliza principalmente en experimentos de clonación para aumentar la fidelidad. La ADN polimerasa Taq es la ADN polimerasa estándar utilizada en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), y se aísla de la bacteria termoestable; Thermus aquaticus. los diferencia clave Entre las dos enzimas se encuentra el microorganismo fuente.. La fusión se aísla del extremófilo., Pyrococcus furiosus mientras que, la Taq polimerasa se aísla del termófilo, Thermus aquaticus.

CONTENIDO

1. Resumen y diferencia clave
2. Que es phusion
3. ¿Qué es la polimerasa Taq?
4. Similitudes entre Phusion y Taq Polymerase
5. Comparación lado a lado - Phusion vs Taq Polymerase en forma tabular
6. Resumen

Que es phusion?

ADN polimerasa de phusion es una nueva polimerasa que se fabrica aislando la enzima de Pyrococcus furiosus, La cual es una archaea extremófila. Estos microbios residen en condiciones de temperatura extremadamente alta, lo que hace que la polimerasa sea una polimerasa altamente estable al calor. La polimerasa de fusión se utiliza para obtener una fidelidad extrema sobre la polimerasa termoestable convencional; Taq polimerasa. La Phusion polimerasa es capaz de amplificar plantillas largas de hasta 7.5 kb de ADN genómico. La capacidad de polimerización óptima de la polimerasa de Phusion es de 72⁰ C. Phusion también se usa en productos de clonación para secuenciación, análisis de expresión y análisis de mutación..

La ADN polimerasa de Phusion tiene la actividad de exonucleasa 3 '- 5'. Esto permite la revisión de la cadena recién sintetizada después de la síntesis. Por lo tanto, los desajustes de nucleótidos se pueden reparar fácilmente. Por lo tanto, tiene una tasa de error menor. Las ventajas generales de la polimerasa de Phusion son:

• Fidelidad extrema
• Alta velocidad y reducido tiempo de extensión.
• Reacciones robustas y requiere optimización mínima.
• Alto rendimiento

Figura 01: Phusion

La principal desventaja de la Phusion polimerasa es que se inhibe en presencia de trifosfato de desoxiuridina (dUTP). Cuando los dUTP se acumulan en la mezcla de reacción, puede inhibir las acciones de la Phusion polimerasa. Esto se evita tratando la mezcla de reacción con dUTPasa antes de agregar la enzima. En la actualidad, se utiliza una variante resistente a DUTP de la polimerasa de Phusion conocida como Pfu Turbo en lugar de la polimerasa de Phusion como remedio para este problema..

¿Qué es la polimerasa Taq??

ADN polimerasa Taq La invención ha revolucionado el campo de la biología molecular. Resolvió un gran problema en la amplificación del ADN. La ADN polimerasa Taq es una enzima polimerasa estable al calor extraída y aislada de la bacteria termófila, Thermus aquaticus. El descubrimiento de estas enzimas conduce al desarrollo de la PCR. Esta enzima ha permitido el uso de la reacción en cadena de la polimerasa en la amplificación del ADN en lugar de las técnicas de clonación laboriosas convencionales. La PCR ahora se utiliza en los campos de diagnóstico molecular, agrícola e industrial con muchas nuevas variaciones agregadas a la técnica.

Figura 02: Taq polimerasa

La ADN polimerasa Taq funciona en el rango de temperatura óptimo entre 72⁰C - 80⁰C. La ADN polimerasa Taq requiere un cofactor; El magnesio por su función. La Taq polimerasa no tiene la capacidad de corrección de 3 '- 5', por lo tanto, la tasa de error de la Taq ADN polimerasa es alta en comparación con los tipos más nuevos de ADN polimerasas como la Phusion polimerasa, etc. Lo mismo en todo el mundo de la ciencia debido a la conveniencia y la flexibilidad de la enzima..

¿Cuáles son las similitudes entre la fusión y la polimerasa Taq??

• Tanto la Fusión como la Taq polimerasa son enzimas polimerizantes que son capaces de agregar nucleótidos al extremo libre 3 'de la cadena de ADN.
• Tanto la Phusion como las Taq polimerasas requieren una secuencia de cebador para iniciar la polimerización.
• Tanto Phusion como Taq polimerasas son estables al calor.
• Las polimerasas Phusion y Taq se utilizan en los mecanismos de PCR para amplificar el ADN..
• Al agregar la polimerasa a la mezcla de reacción, se agregan las polimerasas de Phusion y Taq al final para asegurar la eficiencia de la enzima..
• Las polimerasas Phusion y Taq se sintetizan comercialmente para propósitos experimentales de biología molecular.
• Tanto las polimerasas Phusion como las Taq requieren un cofactor para completar su función.

¿Cuál es la diferencia entre Phusion y Taq Polymerase??

Phusion vs Taq Polymerase
Phusion es una ADN polimerasa aislada de Pyrococcus furiosus y se utiliza principalmente en experimentos de clonación para aumentar la fidelidad..	Taq DNA Polymerase es la DNA polimerasa estándar utilizada en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), y se aísla de la bacteria termoestable., Thermus aquaticus.
Organismo de origen
La phusion se extrae de las arqueas extremófilas. - Pyrococcus furiosus.	Estas obras literarias abarcan desde el período de colonización hasta el período de descolonización..
Capacidad de prueba de lectura
La capacidad de lectura de prueba de 3 '- 5' está presente en Phusion.	La capacidad de lectura de prueba de 3 '- 5' está ausente en la polimerasa Taq.
Fidelidad
La alta fidelidad está ahí con Phusion.	Taq polimerasa muestra baja fidelidad.
Amplificación
La fusión es capaz de amplificar fragmentos largos de ADN..	La Taq polimerasa es capaz de amplificar fragmentos de ADN mucho más cortos..
DUTP envenenamiento
La acción de la fusión es inhibida por la acumulación impar..	Taq polimerasa no es inhibida por dUPT.

Resumen - Phusion vs Taq polimerasa

Phusion y Taq DNA polimerasa son dos polimerasas estables al calor que se utilizan en las técnicas de PCR. La fusión es una polimerasa aislada del extremófilo., Pyrococcus furiosus mientras que, Taq está aislado de las bacterias termoestables Thermus aquaticus. El descubrimiento de la ADN polimerasa Taq conduce a la invención de la PCR. Phusion tiene muchas ventajas sobre Taq que ha hecho de Phusion una mejor opción para producir ADN de alta fidelidad. Sin embargo, la polimerasa Taq todavía se usa como la enzima polimerasa estándar en la PCR. Esta es la diferencia entre Phusion y Taq polimerasa..

Referencia:

1.Biolabs, Nueva Inglaterra. "Taq DNA Polymerases". New England Biolabs: Reactivos para la industria de las ciencias de la vida. Disponible aquí  
2. “Phusion DNA Polymerase”. New England Biolabs. Disponible aquí 

Imagen de cortesía:

1.'GAM ilustrado por Nivin Nasri'By NivinN - Trabajo propio, (CC BY-SA 4.0) vía Commons Wikimedia  
2.'Taq'By Adenosine - Trabajo propio, (CC BY-SA 3.0) vía Commons Wikimedia