los diferencia clave entre los vectores de inserción y reemplazo es que el vector de inserción tiene la capacidad de insertar longitudes moderadas de ADN extraño, mientras que el vector de reemplazo tiene la capacidad de acomodar longitudes mayores de ADN extraño.
Los vectores fagos son los bacteriófagos utilizados para la clonación. Hay dos tipos de vectores de fagos; son vector de inserción y vector de reemplazo. Además, todos los vectores de fagos consisten en genes no esenciales. Sin embargo, estos genes deben eliminarse de los fagos para facilitar nuevas inserciones de ADN extraño.
1. Resumen y diferencia clave
2. ¿Qué son los vectores de inserción?
3. ¿Qué son los vectores de reemplazo?
4. Similitudes entre la inserción y el reemplazo de vectores
5. Comparación lado a lado - Inserción frente a vectores de reemplazo en forma tabular
6. Resumen
En primer lugar, el vector de inserción es la forma más simple de vectores de clonación lambda. De hecho, es un tipo de vector de fago que tiene un sitio de restricción único introducido dentro del genoma del vector en la posición del ADN opcional. Además, el ADN del fago permanece sin ser eliminado. Esta no eliminación del ADN del fago reduce el tamaño de las inserciones (ADN extraño) que se clonarán dentro del vector. Además, estos vectores son útiles en la clonación y expresión de ADNc. GT10, GT11 y Zap son ejemplos de este vector..
Figura 01: Lambda Phage
El vector de inserción consiste en un único sitio de reconocimiento. La función principal de este vector es desarrollar bibliotecas de ADNc derivadas de secuencias de ARNm eucarióticas. Además, solo puede acomodar longitudes de ADN extraño que oscilan entre 05-11 kb. Además, posee un único sitio de escisión para la inserción de ADN extraño..
Vector de reemplazo o vector de sustitución es un tipo de vector de fago desarrollado a partir de la eliminación de una región media de "fragmento de relleno" del ADN del fago. El inserto de ADN extraño deseado reemplaza al ADN del fago..
Figura 02: Vector de reemplazo
Los vectores de reemplazo son importantes para crear bibliotecas genómicas como EMBL4 y Charon40. Estos vectores pueden acomodar una longitud mayor de ADN extraño que varía entre las longitudes de 08-24 kb. La región de relleno también consiste en un gen que hace que el vector del fago no sea viable dentro de un huésped bacteriano.
Inserción vs vectores de reemplazo | |
El vector de inserción es un tipo de vector de fago que tiene un sitio de restricción introducido dentro del genoma del fago en el sitio del ADN opcional. | El vector de reemplazo es un tipo de vector de fago desarrollado a partir de la eliminación de una región intermedia de "fragmento de relleno" del ADN del fago |
Tamaño de los fragmentos de inserción | |
05-11 kb de longitud | 08-24 kb de longitud |
Fragmento de relleno | |
No hay fragmento de relleno | El fragmento de relleno es reemplazado por un inserto extraño |
Función | |
Importante para crear librerías de cDNA | Importante en la creación de bibliotecas de genoma. |
Ejemplos | |
GT10, GT11 y Zap son ejemplos | EMBL4 y Charon40 son ejemplos. |
Sitio de escisión | |
Un sitio de escisión único está presente | El sitio de escisión contiene genes que no son esenciales para el ciclo lítico. |
Ambos vectores de inserción y reemplazo son dos tipos de vectores fágicos. Ambos vectores tienen sitios de restricción que facilitan el alojamiento de nuevos insertos de ADN extraño. Los vectores de inserción son importantes para crear bibliotecas de ADNc, mientras que los vectores de reemplazo son importantes para crear bibliotecas genómicas. Además, los vectores de inserción acomodan inserciones de ADN con una longitud moderada. Pero los vectores de reemplazo pueden acomodar mayores longitudes de inserciones de ADN extraño. En general, esta es la diferencia clave entre los vectores de inserción y reemplazo..
1. Hasty, P, et al. "La eficacia de la inserción frente al reemplazo del vector de orientación varía en diferentes lugares cromosómicos". Biología molecular y celular, Biblioteca Nacional de Medicina de EE. UU., Diciembre de 1994, Disponible aquí.
2. “Vectores de inserción de Lambda”. Biología 335 Notas de clase - Vectores de Lambda, Disponible aquí.
3. “Vector de reemplazo”. Vector de reemplazo - Terminología de Biología Molecular para Vector de reemplazo - GenScript, Disponible aquí.
1. “Lambda phage” por Lizanne Koch - trabajo propio con ChemBioDraw (dominio público) a través de Commons Wikimedia