Diferencia entre hibridación in situ e inmunohistoquímica

Diferencia clave - In Situ Hybridization vs Immunohistochemistry
 

El diagnóstico de cáncer y enfermedades infecciosas es una tendencia popular en la que se utilizan nuevas técnicas basadas en proteómica y genómica para identificar tumores o células infecciosas, su proliferación y los sitios de desarrollo celular y analizar las bases genéticas de la mayoría de las enfermedades transmisibles y no transmisibles. Esto resultará en un procesamiento y diseño preciso de las drogas y en el desarrollo de terapias personalizadas para las enfermedades. La hibridación in situ (ISH) y la inmunohistoquímica (IHC) son dos de las técnicas más utilizadas en la biología del cáncer y la diferencia clave entre la hibridación in situ y la inmunoquímica reside en las moléculas que se utilizan en el procedimiento de análisis.. En ISH, las sondas de ácido nucleico se usan en análisis mientras que, en IHC, se usan anticuerpos monoclonales y policlonales para las determinaciones de diagnóstico.

CONTENIDO

1. Resumen y diferencia clave
2. ¿Qué es la hibridación in situ?
3. ¿Qué es la inmunohistoquímica?
4. Similitudes entre la hibridación in situ y la inmunohistoquímica
5. Comparación lado a lado - Hibridación in situ versus inmunohistoquímica en forma tabular
6. Resumen

¿Qué es la hibridación in situ (ISH)??

La hibridación in situ es una técnica de hibridación de ácido nucleico que se realiza directamente en una porción o sección de tejido, en todo el tejido o en las células. La técnica depende de la teoría del emparejamiento de bases complementarias de Watson Crick, que resulta en híbridos de ADN-ADN o híbridos de ADN-ARN que pueden detectar genes mutados o identificar el gen de interés requerido. Las secuencias de ADN monocatenarias, las secuencias de ADN bicatenarias, las secuencias de ARN monocatenarias o las secuencias de oligonucleótidos sintéticos se utilizan como sondas durante la técnica de hibridación, y estas sondas se marcan con un fósforo radiactivo en su extremo 5 'para los procedimientos de identificación mediante autorradiografía o se marcan con tintes fluorescentes . Hay diferentes tipos de técnicas de ISH disponibles basadas en el tipo de sonda utilizada y el tipo de técnica de visualización seguida.

Figura 01: Hibridación in situ fluorescente

ISH tiene muchas aplicaciones, principalmente en el diagnóstico molecular de enfermedades infecciosas para identificar la presencia de patógenos y confirmar el patógeno a través del diagnóstico molecular. También se utiliza en los campos de la biología del desarrollo, el cariotipo y el análisis filogenético y el mapeo físico de los cromosomas..

Qué es la inmunohistoquímica (IHC)?

En la técnica de IHC, la principal molécula analizada es el antígeno. Durante la IHC, se utilizan anticuerpos monoclonales y policlonales para determinar la presencia de antígenos en el momento de la infección o el estado de proliferación de células malignas. La técnica se basa en la unión de antígeno-anticuerpo y se utilizan marcadores de enzimas para esta técnica; Una de esas aplicaciones es el ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas). Los marcadores también pueden ser anticuerpos marcados con fluorescencia o anticuerpos marcados por radio..

Figura 02: inmunohistoquímica

IHC es ampliamente utilizado para la detección de células cancerosas. Los procedimientos de diagnóstico se dirigen a los antígenos presentes en las células tumorales para identificar y caracterizar el tumor. Se incorpora el mismo procedimiento para diagnosticar agentes infecciosos. Los anticuerpos monoclonales y policlonales también se utilizan para analizar diferentes productos genéticos permitiendo la reacción de unión antígeno-anticuerpo entre la proteína deseada y el anticuerpo sintético administrado.

¿Cuáles son las similitudes entre la hibridación in situ y la inmunohistoquímica??

• ISH e IHC son reacciones altamente específicas..
• Ambas técnicas son altamente precisas..
• Ambas técnicas se pueden utilizar en diagnósticos de cáncer y enfermedades infecciosas..
• Estas técnicas se realizan en ambientes in vitro estériles..
• Ambas son técnicas rápidas que proporcionan resultados reproducibles..
• ISH e IHC utilizan métodos de detección como el etiquetado por radio y las técnicas de fluorescencia.

¿Cuál es la diferencia entre la hibridación in situ y la inmunohistoquímica??

Hibridación in situ vs inmunohistoquímica
ISH es una técnica de hibridación de ácidos nucleicos que se realiza directamente en una porción o sección de tejido o en todo el tejido..	La IHC es una técnica en la que se utilizan anticuerpos monoclonales y policlonales para determinar la presencia de antígenos, que son marcadores de proteínas especiales que se colocan en las superficies celulares..
Tipo de Bio Moléculas Analizadas
ISH analiza los ácidos nucleicos..	IHC analiza proteínas-antígenos.
Bases de la reacción bioquímica.
El apareamiento de bases complementarias entre ADN-ADN o ADN-ARN se produce en esta técnica.	Las interacciones antígeno-anticuerpo están implicadas en la inmunohistoquímica..
Métodos de detección ligados a enzimas
Los métodos de detección ligados a enzimas no se pueden utilizar en ISH.	Los métodos de detección ligados a enzimas se pueden utilizar en IHC.

Resumen - In Situ Hybridization vs Immunohistochemistry

Los diagnósticos moleculares son métodos rápidos y confirmatorios que pueden utilizarse para identificar una enfermedad no transmisible como el cáncer o una enfermedad transmisible, como el VIH o la tuberculosis, en función de los marcadores moleculares presentes en las células que conducen a la manifestación de la enfermedad. Los marcadores moleculares pueden estar presentes en forma de proteínas expresadas o en el nivel genético según el cual se introducen diferentes técnicas nuevas para aumentar la eficiencia y son menos laboriosas, aunque hay un alto costo involucrado con estas técnicas. Por lo tanto, ISH depende de la formación de híbridos ADN-ADN o ADN-ARN, e IHC depende de las reacciones específicas entre el anticuerpo y el antígeno. Esta es la diferencia entre la hibridación in situ..

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Referencias:

1. Duraiyan, Jeyapradha, et al. "Aplicaciones de la inmunohistoquímica". Revista de Farmacia y Ciencias Biológicas, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, agosto de 2012, Disponible aquí. Consultado el 24 de agosto de 2017.
2. “In Situ Hybridization (ISH)”. Centro Nacional de Información Biotecnológica, Biblioteca Nacional de Medicina de los Estados Unidos, Disponible aquí. Consultado el 24 de agosto de 2017.

Imagen de cortesía:

1. "FISH (Fluorescencia In Situ Hibridación)" Por MrMatze - Trabajo propio (CC BY-SA 3.0) vía Commons Wikimedia
2. “Immunohistochemicalstaining2” Por Imoen en la Wikipedia en inglés. (CC BY-SA 3.0) vía Commons Wikimedia