La unidad formadora de colonias (CFU) y el número más probable (MPN) son dos métodos utilizados para enumerar microorganismos en muestras. Ambos parámetros se utilizan para detectar la calidad del agua y las bacterias indicadoras fecales en muestras de agua. La unidad formadora de colonias es una medida utilizada para enumerar el número de células bacterianas viables o células fúngicas en un volumen o peso específico de una muestra determinada. La unidad estándar para este parámetro es CFU / ml o CFU / g. El número más probable es otra unidad utilizada para medir el número de células bacterianas viables en una muestra líquida. La diferencia clave entre CFU y MPN es que CFU se calcula a partir de las colonias de bacterias y hongos que crecen en una placa de agar sólido mientras MPN se calcula a partir de bacterias viables que crecen en un medio líquido.
1. Resumen y diferencia clave
2. ¿Qué es CFU?
3. ¿Qué es la MPN?
4. Comparación lado a lado - CFU vs MPN en forma tabular
5. Resumen
Unidad de formación de Colonia (CFU) es un parámetro que mide el número de células bacterianas o fúngicas viables en una muestra dada. El método que cuenta las unidades formadoras de colonias se denomina recuento de placa estándar. Las colonias viables que aparecen en las placas de agar se expresan como CFU por 1 ml (unidad formadora de colonias por mililitro) de la muestra para líquidos o CFU por 1 g (unidad formadora de colonias por un gramo) de la muestra para sólidos.
Hay dos métodos comunes utilizados para medir CFU en una muestra. Son método de la placa de propagación y método de verter plato. Estos dos métodos son compatibles con una técnica llamada dilución en serie. Las muestras diluidas en serie permiten obtener un número contable de colonias en la superficie de agar. Un volumen conocido de muestra puede extenderse sobre la superficie de una placa de agar, o mezclarse con agar y verterse sobre una placa. Luego se incuba la placa y se cuentan las colonias que surgen. El número de colonias se relaciona con el número de microorganismos dentro de la muestra original. Las placas que muestran demasiadas colonias o muy pocas colonias están excluidas de contar porque los resultados pueden no ser estadísticamente exactos en esas placas. Estadísticamente, el mejor rango es de 30 a 300 colonias en una placa de agar. Por lo tanto, las placas correctas deben seleccionarse para una enumeración precisa. Se realiza dilución en serie para la función anterior..
Una vez que se cuenta el número de colonias viables en las placas, se pueden calcular las UFC / ml utilizando la siguiente ecuación.
UFC por ml de muestra original = número de colonias en una placa X factor de dilución
Factor de dilución = (1 / Dilución de la placa)
Por ejemplo, si consigues 149 colonias en la placa del 10-4 Dilución, entonces el número de bacterias en 1 ml de la muestra original se puede calcular de la siguiente manera:
UFC / ml = (149) x (1/10-4)
= 149 × 104 o 1490000
= 1. 49 x 106
Figura 01: Unidad de formación de colonias
los numero mas probable Es una medida alternativa a UFC / ml. MPN también estima las células viables en una muestra líquida. Cuenta con los organismos que crecen en un cultivo líquido y es una técnica predominantemente bacteriológica. Este método es particularmente útil para muestras que contienen bajas concentraciones de células bacterianas; por ejemplo, leche, agua potable, etc. El valor de MPN se expresa por 100 ml de volumen. MPN se basa en un método estadístico basado en la teoría de la probabilidad. Existen tablas estadísticas diseñadas para encontrar valores de NMP por 100 ml de la muestra. Estas tablas muestran los resultados con límites de confianza del 95%..
El valor de MPN se calcula después de realizar una técnica llamada método de fermentación de múltiples tubos. Tres conjuntos de tubos que contienen un medio de cultivo adecuado se inoculan con tres volúmenes diferentes de la muestra, como 10 ml, 1 ml y 0,1 ml, y se incuban para el crecimiento. Después del período de incubación, los tubos se puntúan con + (positivo) o - (negativo) para la presencia o ausencia de crecimiento. El patrón de resultados positivos y negativos luego se compara con una tabla de probabilidades estadísticas de MPN para estimar el número de microorganismos. Luego se da el valor de MPN para 100 ml de la muestra. La MPN se usa ampliamente para detectar bacterias coliformes presentes en muestras de agua.
Figura 02: tabla de MPN
CFU vs MPN | |
CFU es una medida utilizada para expresar el número de colonias bacterianas o fúngicas viables en una muestra dada. | La MPN es una medida alternativa a la UFC y mide el número de células bacterianas viables en una muestra líquida. |
Unidad | |
UFC / ml o UFC / g | NMP / 100 ml |
Cálculo | |
La CFU se calcula contando el número de colonias cultivadas en placas de agar. | La MPN se calcula comparando los patrones positivos y negativos de los tubos con la tabla estadística de la MPN. |
Técnica de dilución en serie | |
Se realiza una dilución en serie antes de colocar las muestras en placas de agar.. | La dilución en serie normalmente no se realiza cuando se calcula la MPN |
Métodos | |
El método de la placa de extensión y el método de la placa de vertido son dos tipos de métodos que se realizan para obtener CFU. | La fermentación de tubos múltiples es el método que se realiza para obtener el valor de MPN. |
La medición del crecimiento microbiano es necesaria por muchas razones. En las plantas de procesamiento de alimentos, es necesario medir el nivel y el tipo de microorganismos en los alimentos. En la industria alimentaria y la medicina, es necesario garantizar que los tratamientos de esterilización se apliquen de manera efectiva. En las plantas de tratamiento de aguas residuales, se requiere tomar el conteo de microbios de manera rutinaria. Cuando se optimiza el procedimiento en biología molecular, se requiere medir el número de colonias en las placas. Por lo tanto, hay diferentes métodos de enumeración y medición de crecimiento disponibles. CFU y MPN son dos de estos métodos que se adoptan ampliamente en diversos campos. CFU es una medida del número de colonias de bacterias y hongos viables presentes en una muestra dada. Se calcula utilizando el método de conteo de placa estándar o el método de conteo de placa viable. La MPN es otra medida que expresa el número de células bacterianas presentes en un volumen dado de la muestra líquida. Se calcula utilizando el método de fermentación de múltiples tubos y la tabla NMP. Esta es la diferencia entre CFU y MPN.
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"Unidad formadora de colonias". Wikipedia. Fundación Wikimedia, 28 de mayo de 2017. Web. Disponible aquí. 01 de junio de 2017.
“Microbiología - 014 - Número más probable”. Microbiología - 014 - Número más probable | Programa de Pregrado en Microbiología. N.p., n.d. Web. Disponible aquí. 01 de junio de 2017.
1. "Recuento manual de UFC" Por Quentin Geissmann - Trabajo propio (CC BY-SA 3.0) vía Commons Wikimedia
2. "OSC Microbio 00 EE MPNTable" Por CNX OpenStax - (CC BY 4.0) vía Commons Wikimedia