Diferencia entre citometría de flujo y FACS

Diferencia clave - Citometría de flujo vs FACS

En el contexto de la teoría celular, las células son la unidad estructural y funcional básica de todos los organismos vivos. La clasificación celular es una metodología que se utiliza para separar diferentes células según las características fisiológicas y morfológicas. Pueden ser de características intracelulares o extracelulares. La interacción del ADN, el ARN y las proteínas se consideran propiedades interactivas intracelulares, mientras que la forma, el tamaño y las diferentes proteínas de superficie se consideran propiedades extracelulares. En la ciencia moderna, las metodologías de clasificación celular han llevado a ayudar a las diferentes investigaciones en estudios biológicos y también al establecimiento de nuevos principios a través de la investigación en medicina. La clasificación celular se realiza en varias metodologías que incluyen tanto primitivas con menos equipos como metodologías tecnológicas avanzadas con el uso de maquinaria sofisticada. Citometría de flujo, clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS), la selección de células magnéticas y la clasificación de células individuales son las principales metodologías utilizadas. La citometría de flujo y el FACS se desarrollan para diferenciar las células según sus propiedades ópticas. FACS es un tipo especializado de citometría de flujo.. La citometría de flujo es una metodología que se utiliza durante el análisis de una población heterogénea de células según diferentes moléculas de superficie celular, tamaño y volumen que permite la investigación de células individuales.. FACS es un proceso por el cual una muestra de mezcla de células se clasifica de acuerdo con sus características de dispersión de luz y fluorescencia en dos o más contenedores. Este es el diferencia clave entre citometría de flujo y FACS.

CONTENIDO

1. Resumen y diferencia clave
2. ¿Qué es la citometría de flujo?
3. ¿Qué es FACS?
4. Similitudes entre la citometría de flujo y FACS
5. Comparación lado a lado - Citometría de flujo vs FACS en forma tabular
6. Resumen

¿Qué es la citometría de flujo??

La citometría de flujo es un método que se utiliza para examinar y determinar la expresión de moléculas intracelulares y la superficie celular y para definir y caracterizar distintos tipos de células. También se utiliza para determinar el volumen celular y el tamaño de la celda y para evaluar la pureza de las subpoblaciones que están aisladas. Esto permite la evaluación multiparamétrica de celdas individuales casi al mismo tiempo. La citometría de flujo se utiliza para medir la intensidad de la fluorescencia que se produce debido a los anticuerpos marcados con fluorescencia que ayudan a identificar proteínas o ligandos que se unen a las células asociadas..

Figura 01: Citometría de flujo

En general, la citometría de flujo incluye principalmente tres subsistemas. Son la fluidez, la electrónica y la óptica. En la citometría de flujo, hay cinco componentes principales disponibles que se utilizan en la clasificación celular. Son, una celda de flujo (una corriente de líquido que se utiliza para transportarlos y alinear las celdas para el proceso de detección óptica), un sistema de medición (puede ser de diferentes sistemas, como lámparas de mercurio y xenón, de alta potencia refrigerado por agua o láseres de diodo de baja potencia o láseres de diodo), un ADC; Convertidor analógico a digital, sistema de amplificación y computadora para análisis. La adquisición es el proceso por el cual los datos se recolectan de las muestras utilizando un citómetro de flujo. Este proceso está mediado por una computadora que está conectada con el citómetro de flujo. El software presente en la computadora analiza la información suministrada a la computadora desde el citómetro de flujo. El software también tiene la capacidad de ajustar los parámetros del experimento que controla el citómetro de flujo..

¿Qué es FACS??

En el contexto de la citometría de flujo., Clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS) es un método que se utiliza para diferenciar y clasificar una muestra de una mezcla de células biológicas. Las celdas están separadas de dos o más contenedores. El método de clasificación se basa en las características físicas de la célula, que incluyen la dispersión de la luz y las características de fluorescencia de la célula. Esta es una técnica científica importante, que se puede utilizar para obtener resultados cuantitativos y cualitativos confiables de las señales de fluorescencia que se emiten desde cada célula. Durante el FACS, inicialmente, la mezcla de células previamente obtenida; una suspensión se dirige al centro de una corriente estrecha de líquido que fluye rápidamente. El flujo de líquido está diseñado para separar las celdas en la suspensión según el diámetro de cada celda. Se aplica un mecanismo de vibración a la corriente de suspensión que resulta en la formación de gotitas individuales..

Figura 02: FACS

El sistema se calibra para crear una sola gota con una celda. Justo antes de la formación de gotas, la suspensión de flujo se mueve a lo largo de un aparato de medición de fluorescencia que detecta la característica de fluorescencia de cada célula. En el punto de formación de las gotitas, se coloca un anillo de carga eléctrica que induce una carga al anillo antes de medir la intensidad de la fluorescencia. Una vez que las gotas se forman a partir de la corriente de suspensión, una carga queda atrapada dentro de las gotas que luego ingresa en un sistema de desviación electrostática. Según la carga, el sistema desvía las gotas a diferentes contenedores. El método de aplicación de la carga varía según los diferentes sistemas utilizados en FACS. El equipo utilizado en FACS se conoce como un clasificador de células activadas por fluorescencia..

¿Cuál es la similitud entre la citometría de flujo y FACS??

  • La citometría de flujo y el FACS se desarrollan para diferenciar las células según sus propiedades ópticas..

¿Cuál es la diferencia entre citometría de flujo y FACS??

Citometría de Flujo vs FACS

La citometría de flujo es una metodología que se utiliza durante el análisis de una población heterogénea de células según diferentes moléculas de superficie celular, tamaño y volumen que permite la investigación de células individuales.. FACS es un proceso por el cual una muestra de mezcla de células se clasifica de acuerdo con sus características de dispersión de luz y fluorescencia en dos o más contenedores.

Resumen - Flujo Citometría vs FACS

La célula es la unidad estructural y funcional básica de todos los organismos vivos. La clasificación de células es el proceso mediante el cual las células se aíslan y diferencian en diferentes categorías según sus propiedades intracelulares y extracelulares. La citometría de flujo y el FACS son dos metodologías importantes en la clasificación celular. Ambos procesos se desarrollan para diferenciar las células según sus propiedades ópticas. La citometría de flujo es una metodología que se utiliza durante el análisis de una población heterogénea de células según diferentes moléculas de superficie celular, tamaño y volumen que permite la investigación de células individuales. FACS es un proceso mediante el cual una mezcla de muestra de células se clasifica de acuerdo con sus características de dispersión de luz y fluorescencia en dos o más contenedores. Esta es la diferencia entre citometría de flujo y FACS..

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Referencia:
  1. Citometría de flujo (FCM) / FACS | Clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS). Consultado el 22 de septiembre de 2017. Disponible aquí
  2. Ibrahim, Sherrif F. y Ger van den Engh. “Citometría de flujo y clasificación celular”. SpringerLink, Springer, Berlín, Heidelberg, 1 de enero de 1970 ... Consultado el 22 de septiembre de 2017. Disponible aquí
Imagen de cortesía:
  1. 'Cytometer'By Kierano - Trabajo propio, (CC BY 3.0) vía Commons Wikimedia
  2. 'Clasificación celular asistida por fluorescencia (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Desarrollo de un sistema de modelo in vitro para estudiar la interacción de Equus caballus IgE con su receptor FcεRI de alta afinidad (tesis doctoral), The University of Sheffield,(CC BY-SA 3.0) vía Commons Wikimedia