La diferencia clave entre HPLC y HPTLC es que HPLC permite la separación cuantitativa de componentes en una muestra, mientras que HPTLC no permite la separación cuantitativa de componentes en una muestra.
La cromatografía es un método de separación física que se utiliza para separar e identificar los componentes en una mezcla. Tanto la HPLC como la HPTLC son técnicas cromatográficas. HPLC es cromatografía líquida de alto rendimiento. HPTLC es cromatografía de capa fina de alto rendimiento..
1. Resumen y diferencia clave
2. ¿Qué es HPLC?
3. Qué es HPTLC
4. Comparación lado a lado - HPLC vs HPTLC en forma tabular
5. Resumen
HPLC es cromatografía líquida de alto rendimiento. Es una técnica analítica utilizada para separar, identificar y cuantificar componentes en una mezcla. En esta técnica, la muestra se disuelve en un disolvente adecuado. Luego, el disolvente con la muestra se pasa a través de una bomba con una presión dada. La bomba está llena de material adsorbente sólido. Luego, algunos componentes se unen fuertemente al material absorbente, mientras que otros componentes se unen libremente. Esto hace que los componentes tengan diferentes caudales a través de la bomba. Por lo tanto, los componentes se pueden separar fácilmente..
Figura 01: Un sistema de HPLC
El material adsorbente que llena la bomba se conoce como fase estacionaria. El solvente con la muestra disuelta se conoce como la fase móvil. La bomba utilizada en esta técnica se llama la columna. La columna se llena con un material adsorbente, más comúnmente, partículas de sílice. El tamaño de estas partículas puede oscilar entre 2 y 50 μm. El proceso de separación se ve afectado por la composición de la fase móvil y la temperatura del sistema. Las interacciones entre la fase estacionaria y el componente en la muestra pueden ser interacciones hidrófobas, interacciones dipolo-dipolo, enlaces iónicos, etc..
La presión de operación de la HPLC es considerablemente más alta que la de la cromatografía de líquidos tradicional. Se encuentra alrededor de 50-350 bar. La diferencia entre cromatografía líquida y HPLC es que en la cromatografía líquida, la muestra cae a través de la columna por gravedad, mientras que, en HPLC, la muestra se presuriza a través de la columna. El tamaño de la columna y las partículas absorbentes también son muy pequeñas en comparación con la cromatografía líquida tradicional. Sin embargo, la resolución dada por la técnica de HPLC es superior..
HPTLC es cromatografía de capa fina de alto rendimiento. Es la forma avanzada y automatizada de lo tradicional. TLC. Esta técnica proporciona una resolución eficiente en un corto período de tiempo. En este método de análisis, la muestra y una referencia pueden analizarse al mismo tiempo, lo que permite comparar la muestra con la referencia. Da una precisión analítica mejorada que otras técnicas cromatográficas. El tiempo necesario para el análisis es menor. La técnica es una técnica de bajo costo..
Figura 02: Un análisis de colorantes alimentarios utilizando HPTLC
El método de HPTLC es un proceso simple, y el paso de preparación de la muestra también se elimina (en el TLC tradicional, el paso de preparación de la muestra se incluye antes de la separación. Este paso implica la limpieza y enriquecimiento). El disolvente se puede utilizar directamente sin ningún tratamiento previo, aunque otras técnicas cromatográficas requieren tratamientos previos como la desgasificación, la filtración, etc..
El material adsorbente utilizado en HPTLC es sílice con tamaños de partículas muy pequeños. En la TLC tradicional, el tamaño de partícula de la sílice es de 5-20 μm, mientras que, en HPTLC, es de 4-8 μm. La muestra se aplica a la placa HPTLC utilizando un aplicador. Da una aplicación uniforme y segura. Luego las placas se colocan en una cámara que tiene la fase móvil. La cámara debe estar saturada con el vapor de la fase móvil. Después del proceso de HPTLC, se pueden detectar los puntos que se han movido. Al detectar las manchas en la placa, la técnica HPTLC utiliza una región UV adecuada o una cámara de yodo.
HPLC vs HPTLC | |
HPLC es cromatografía líquida de alto rendimiento.. | HPTLC es cromatografía de capa fina de alto rendimiento.. |
Técnica | |
En HPLC, la fase móvil con el solvente se pasa a través de una columna llena con la fase estacionaria.. | En HPTLC, la muestra se mancha en una placa de TLC y se coloca dentro de una cámara que contiene la fase móvil; luego se permite que la muestra migre hacia arriba la placa junto con la fase móvil. |
Medición | |
En HPLC, las diferencias entre los caudales de los componentes a través de la columna se utilizan para separar los componentes en la muestra. | En HPTLC, las diferencias entre las distancias recorridas por cada componente en la muestra se utilizan para separar los componentes en la muestra. |
Separación Cuantitativa | |
HPLC permite la separación cuantitativa de componentes en una muestra. | HPTLC no permite la separación cuantitativa de componentes en una muestra. |
HPLC y HPTLC son dos técnicas cromatográficas. La diferencia clave entre HPLC y HPTLC es que la HPLC permite la separación cuantitativa de componentes en una muestra, mientras que la HPTLC no permite la separación cuantitativa de componentes en una muestra.
1. “Cromatografía líquida de alto rendimiento”. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 10 de abril de 2018, Disponible aquí.
2. “HPTLC”. LinkedIn SlideShare, 30 de mayo de 2011, Disponible aquí.
1. “HPTLCplatetoMS” por Kjaergaard en la Wikipedia en inglés - Transferido de en.wikipedia a Commons (dominio público) a través de Commons Wikimedia
2. "Hplc" Por PD Dr. rer. nat habil. Gertrud Morlock Profesor adjunto (Privatdozentin) Universidad de HohenheimInstituto de Química de Alimentos - G. Morlock, C. Oellig, CAMAG Servicio de Bibliografía 103 (2009) a través de Commons Wikimedia