Diferencia entre la afinidad y la cromatografía de intercambio iónico

los diferencia clave entre afinidad y cromatografía de intercambio iónico es que podemos usar la cromatografía de afinidad para separar los componentes cargados o no cargados en una mezcla, mientras que podemos usar la cromatografía de intercambio iónico para separar los componentes cargados en una mezcla.

La cromatografía es una técnica que podemos usar para separar los componentes deseados en una mezcla. Existen diferentes tipos, como cromatografía líquida, cromatografía de gases, etc. La cromatografía de afinidad y la cromatografía de intercambio iónico son dos subcategorías de la cromatografía líquida. Además, en estas técnicas, hay dos fases. A saber, son la fase estacionaria y la fase móvil. El propósito de estas técnicas es separar los componentes, dependiendo de la unión de los componentes, en la fase móvil en la superficie de la fase estacionaria..

CONTENIDO

1. Resumen y diferencia clave
2. ¿Qué es la cromatografía de afinidad?
3. ¿Qué es la cromatografía de intercambio iónico?
4. Comparación lado a lado: cromatografía de intercambio de iones de afinidad en forma tabular
5. Resumen

¿Qué es la cromatografía de afinidad??

La cromatografía de afinidad es una técnica bioquímica que utilizamos para separar componentes en una mezcla, dependiendo de las interacciones entre estos componentes..

Las interacciones que utilizamos en este caso incluyen los siguientes:

1. Interacciones antígeno-anticuerpo
2. Interacciones enzima-sustrato
3. Interacciones receptor-ligando
4. Interacciones proteína-ácido nucleico.

En esta técnica, usamos las propiedades moleculares de las moléculas para esta técnica de separación. Aquí, permitimos que el compuesto deseado interactúe con una fase estacionaria a través de enlaces de hidrógeno, interacción iónica, puentes disulfuro, interacción hidrofóbica, etc. Las moléculas que no interactúan con la fase estacionaria se eluirán primero. Así, podemos separarlo de la mezcla. El compuesto deseado permanecerá unido a la fase estacionaria. Por lo tanto, podemos separarlo usando un disolvente de elución y hacer que se eluya para separarlo también.

Figura 01: Una columna cromatográfica

La cromatografía de afinidad es útil para purificar y concentrar una sustancia de una mezcla utilizando una solución tampón. Además, es útil para reducir las sustancias no deseadas en una mezcla. Al considerar el aparato que usamos para este proceso, debemos usar una columna llena con nuestra fase estacionaria. Luego, deberíamos cargar la fase móvil que contiene las biomoléculas que vamos a separar. A continuación, permita que se unan con la fase estacionaria. Luego, utilizando un tampón de lavado, podemos separar las biomoléculas no objetivo, pero las moléculas objetivo deben tener una alta afinidad por la fase estacionaria para que el proceso de separación sea exitoso..

¿Qué es la cromatografía de intercambio iónico??

La cromatografía iónica es una forma de cromatografía líquida en la que podemos analizar sustancias iónicas. A menudo, lo usamos para analizar aniones y cationes inorgánicos (es decir, aniones de cloruro y nitrato y cationes de potasio, sodio). Aunque es menos común, también podemos analizar los iones orgánicos. Además, podemos usar esta técnica para la purificación de proteínas porque las proteínas son moléculas cargadas a ciertos valores de pH. Aquí, utilizamos una fase estacionaria sólida a la que se pueden unir las partículas cargadas. Por ejemplo, podemos usar la resina de poliestireno-divinilbenceno como soporte sólido..

Figura 02: Fases de la cromatografía de intercambio iónico

Para explicar esto con más detalle, la fase estacionaria tiene iones fijos, como los aniones sulfato o los cationes de amina cuaternaria. Cada uno de estos debe asociarse con un contraión (un ion con carga opuesta), si queremos mantener la neutralidad de este sistema. En este caso, si el contraión es un catión, el sistema se denomina resina de intercambio catiónico. Pero, si el contraión es un anión, el sistema es una resina de intercambio aniónico..

Hay cinco fases principales en un proceso de intercambio iónico;

1. Etapa inicial
2. Adsorción de destino
3. Inicio de la elución
4. Fin de elución
5. Regeneración

¿Cuál es la diferencia entre la afinidad y la cromatografía de intercambio iónico??

La cromatografía de afinidad es una técnica bioquímica que utilizamos para separar componentes en una mezcla, dependiendo de las interacciones entre estos componentes, mientras que la cromatografía iónica es una forma de cromatografía líquida en la que podemos analizar sustancias iónicas. Por lo tanto, la principal diferencia entre la afinidad y la cromatografía de intercambio iónico es que podemos usar la cromatografía de intercambio iónico solo para la separación de sustancias iónicas, mientras que la cromatografía de afinidad es capaz de separar las partículas cargadas y no cargadas. Al considerar el principio de funcionamiento, la diferencia entre la afinidad y la cromatografía de intercambio iónico es que la cromatografía de afinidad se produce debido al hecho de que las moléculas diana tienen una alta afinidad por la fase estacionaria. Sin embargo, para la cromatografía de intercambio iónico, las moléculas diana tienen una carga opuesta a la de la superficie de la fase estacionaria.

La siguiente infografía presenta la diferencia entre la afinidad y la cromatografía de intercambio iónico como una comparación lado a lado..

Resumen - Afinidad frente a la cromatografía de intercambio iónico

En resumen, la afinidad y la cromatografía de intercambio iónico son dos formas de técnicas de cromatografía líquida. La diferencia clave entre la afinidad y la cromatografía de intercambio iónico es que podemos usar la cromatografía de afinidad para separar los componentes cargados o no cargados en una mezcla, mientras que podemos usar la cromatografía de intercambio iónico para separar los componentes cargados en una mezcla.

Referencia:

1. “Cromatografía de afinidad”. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 5 de octubre de 2018. Disponible aquí 
2. Libretextos. “Cromatografía de intercambio iónico”. Química LibreTexts, Libretexts, 29 de diciembre de 2016. Disponible aquí  

Imagen de cortesía:

1. "Resina de níquel" Por Pdcook - Trabajo propio, (CC BY-SA 3.0) vía Commons Wikimedia 
2. "Iex" por Daliak (dominio público) a través de Commons Wikimedia